Республиканская референс-лаборатория (бактериологическая лаборатория)

О нас

Республиканская референс-лаборатория (бактериологическая лаборатория) предоставляет качественный, доступный и надежный диагностический сервис с использованием современных технологий для удовлетворения потребностей клиентов.

Республиканская референс-лаборатория оснащена современным лабораторным оборудованием и осуществляет микробиологическую и молекулярно-генетическую диагностику туберкулеза, микобактериозов, гнойно-воспалительных и инфекционных заболеваний и выполняет следующие виды исследований:

— молекулярный экспресс-тест для обнаружения ДНК M. tuberculosis complex и определение мутаций, связанных с устойчивостью к лекарственным препаратам (GeneXpert);

— тестирование лекарственной чувствительности и идентификация микобактерий с использованием молекулярно-генетического метода (LPA);

— бактериологические исследования на туберкулез и тестирование лекарственной чувствительности с использованием жидких и плотных питательных сред;

— микроскопические исследования на туберкулез;

— микробиологическая диагностика бактериальных и грибковых инфекций;

— идентификация и определение чувствительности к антибиотикам возбудителей бактериальных инфекций с использованием автоматизированной системы;

— идентификация грибов и определение их чувствительности к противогрибковым препаратам;

— санитарно-бактериологические исследования;

— ПЦР-диагностика инфекционных заболеваний.

Республиканская референс-лаборатория аккредитована на соответствие стандарту СТБ ISO 15189-2015 (ISO 15189:2012) «Медицинские лаборатории. Требования к качеству и компетентности».

В лаборатории функционирует система управления качеством. Лаборатория принимает участие в международной программе по внешней оценке качества, проводимой сетью Супранациональных референс лабораторий ВОЗ. Высокое качество нашей работы подтверждено многочисленными сертификатами.

Порядок сбора, хранения и доставки биологического материала для диагностики ТБ в ГУ «РНПЦ пульмонологии и фтизиатрии»

№ п/п	Исследуемый материал	Условия сбора материала	Посуда	Количество	Максимально допустимое время доставки в лабораторию	Хранение (при необходимости)
1	Мокрота	Пациент прополаскивает рот и откашливает мокроту 3–5 раз	Стерильный контейнер для мокроты	3-5 мл	1-2 часа	Холодильник +2-+8°С 1–3 дня
2	Индуцированная мокрота, назофарингеальный аспират	Пациент ингалирует стерильный гипертонический раствор с использованием ультразвукового ингалятора	Стерильный контейнер для мокроты	3-5 мл	1-2 часа	Холодильник +2-+8 С 1-3 дня
3	Промывные воды желудка	До процедуры нельзя принимать пищу в течение 12 ч. Пациент выпивает 200 мл дистиллированной воды, после чего в желудок вводится зонд и аспирируется содержимое желудка в стерильную пробирку. Детям после сна вводится назогастральный зонд и аспирируется 2-5 мл содержимого желудка, если содержимое желудка не удается получить, вводится 5-10 мл физиологического раствора, который потом аспирируется. К образцу добавляется 8 % содовый раствор в соотношении 1:1	Стерильная пробирка	Весь материал	30 мин., если не проведена нейтрализация кислотности желудочного сока	Немедленная отправка в лабораторию
4	Моча	Гигиена наружных половых органов с использованием мыла, дезинфицирующие средства не используются	Стерильный контейнер	50-100 мл	1-2 часа	Холодильник +2-+8 °С 24 часа
5	Плевральные и иные пунктаты	Проводится плевральная или иная пункция	Стерильная пробирка	5-10 мл	Сразу после сбора	Холодильник +2-+8 °С 24 часа
6	СМЖ	Выполнение СМП с исследованием СМЖ	Стерильная пробирка	> 5 мл, детям в зависимости от возраста	Сразу после сбора, в течение 15 мин.	Холодильник +2-+8 °С 1-2 часа
7	Кал	Сбор кала из образца (прямой кишки) в специально предназначенную посуду	Стерильная пробирка	1 г	1-2 часа	Холодильник +2-+8 °С 24 часа
8	Кровь	Берется кровь из вены (место забора крови дезинфицируется 70 % спиртом)	Флакон со специальной средой для гемокультиватора	3 мл	1-2 часа	При комнатной температуре до доставки в лабораторию в максимально короткие сроки
9	Гнойное отделяемое, менструальная кровь	Берется материал стерильным шприцем или тампоном и помещается в стерильную пробирку	Стерильная пробирка	1-5 мл	1-2 часа	Холодильник +2-+8 °С 24 часа
10	Операционный и биопсийный материал	Фрагмент ткани патологического образования	Стерильная посуда	—	1-2 часа	Холодильник +2-+8 °С до 72 часов

Правила сбора, хранения и транспортировки биологического материала

1. Биологический материал, к которому относится мокрота, в том числе индуцированная, промывные воды желудка, аспираты (плевральный, назофарингеальный и иные), СМЖ, операционный и биопсийный материалы, моча и иные помещаются в специальную стерильную емкость (контейнер, пробирка, флакон) и доставляются в Республиканскую референс-лабораторию (далее – РРЛ), осуществляющую диагностику ТБ, в кратчайшие сроки. Если биологический материал невозможно доставить в РРЛ в течение 10-15 минут после забора материала, он немедленно помещается в холодильник и хранится при температуре +2 — +8 °С.

2. Заполнение направлений на исследование:

а) Заполните направления на каждый вид исследования (микроскопия нативной мокроты, посев, исследование ВАСТЕС MGIT 960, GeneXpert) для каждого образца. Заполнить направления на исследование разборчиво; фамилию, имя, отчество написать печатными буквами.

б) Укажите на бланках направления на исследование следующую информацию:

фамилия, имя, отчество пациента (полностью, без сокращений);
персональный номер пациента;
пол;
дата рождения (день, месяц, год);
адрес пациента (населенный пункт, улица, дом, квартира);
отделение, направляющее образец для исследования;
тип образца;
дата и время сбора образца;
цель исследования (диагностика или мониторинг лечения);
сведения о полученном лечении (менее 1 месяца или более 1 месяца);
фамилия лечащего врача;

все срочные образцы должны иметь маркировку «Срочно» (красным маркером или стержнем). Укажите причину срочности запроса.

3. Сбор материала для исследования

3.1. Мокрота

Проинструктируйте пациента, чтобы он перед сдачей мокроты заранее прополоскал рот кипяченой водой для удаления из полости рта остатков пищи и контаминирующих бактерий.
Объясните пациенту, что исследование мокроты проводится для установления диагноза и назначения правильного режима лечения или для контроля эффективности лечения, поэтому очень важно собрать качественный образец мокроты, чтобы результат исследования был достоверным.
Расскажите пациенту, что следует откашливать мокроту из глубоких отделов легких, а не собирать слюну или носоглоточную слизь.
Промаркируйте контейнер для мокроты на стенке (а не на крышке) перманентным маркером, указав фамилию и инициалы пациента, название отделения и номер пробы (если применимо).
Сверьте маркировку контейнера с информацией, указанной в направлениях на исследование.
Выдайте пациенту контейнер для мокроты, продемонстрируйте, как открывать и закрывать его.
Объясните и продемонстрируйте пациенту, что для получения мокроты из глубоких отделов легких он должен:
сделать глубокий вдох, задержать дыхание на несколько секунд и затем медленно выдохнуть;
сделать второй глубокий вдох, задержать дыхание на несколько секунд и затем медленно выдохнуть;
вдохнуть в третий раз и с силой выдохнуть воздух;
вдохнуть еще раз и затем покашлять.
Объясните пациенту, что для получения мокроты ему может потребоваться повторить дыхательные упражнения несколько раз.
Объясните пациенту, что после появления продуктивного кашля он должен открыть контейнер, поднести его к губам, аккуратно сплюнуть в него мокроту и плотно закрыть контейнер.
Расскажите пациенту, что качественным материалом является слизистая или слизисто-гнойная мокрота, которая может содержать включения белесоватого, желтого, серого или бурого цвета. Для исследования необходимо получить достаточное количество мокроты (3-5 мл).
Когда пациент закончит сбор мокроты, оцените объем и качество собранного образца через стеклянное окно в двери кабины.
Если пациент собрал достаточный по объему и качеству образец, попросите его закрыть контейнер с мокротой и поставить его в штатив, находящийся в контейнере для транспортировки образцов.
Если пациент собрал недостаточный по объему образец мокроты, попросите его покашлять еще, чтобы получить образец достаточного объема. Помните, что многие пациенты не в состоянии собрать мокроту в течение нескольких минут. Необходимо дать им достаточно времени и дождаться действительно глубокого кашля.
Если мокроту получить не удалось, контейнер считается использованным. Сбросьте его в контейнер с дезинфицирующим средством. Направьте пациента на раздражающую ингаляцию.
После завершения процедуры сбора мокроты всех пациентов проверьте соответствие числа и маркировки контейнеров с мокротой числу и информации заполненных направлений на исследование, плотность закрывания крышек контейнеров для сбора мокроты.
Закройте контейнер для транспортировки.

3.2. Индуцированная мокрота

Исследование этого материала проводится с помощью небулайзера, в случае невозможности самостоятельного сбора мокроты пациентом.
2. Проинструктируйте пациента, чтобы он перед сдачей мокроты заранее прополоскал рот кипяченой водой для удаления из полости рта остатков пищи и контаминирующих бактерий.
3. Промаркируйте контейнер для мокроты на стенке (а не на крышке) перманентным маркером, указав фамилию и инициалы пациента, название отделения и номер пробы (если применимо).
4. Сверьте маркировку контейнера с информацией, указанной в направлениях на исследование.
Выдайте пациенту контейнер для сбора мокроты, продемонстрируйте, как открывать и закрывать его.
Объясните пациенту, что после появления продуктивного кашля он должен открыть контейнер, поднести его к губам, аккуратно сплюнуть в него мокроту и плотно закрыть контейнер.
Проконтролируйте герметичность закрывания контейнера, поставьте его в штатив, находящийся в контейнере для транспортировки образцов.
Индуцированная мокрота напоминает по внешнему виду и консистенции слюну. Во избежание выбраковки материала укажите в бланке направления, что материал получен после аэрозольной ингаляции.
После завершения процедуры сбора индуцированной мокроты всех пациентов проверьте соответствие числа и маркировки контейнеров с мокротой числу и информации заполненных направлений на исследование, плотность закрывания крышек контейнеров для сбора мокроты.
Закройте контейнер для транспортировки.

3.3. Промывные воды желудка

Сбор промывных вод желудка производится врачом-эндоскопистом с помощью назогастрального зонда. Пациент не должен принимать пищу в течение 12 ч до процедуры.
1. Аспирируйте 2-5 мл желудочного содержимого в стерильный контейнер.
1. Убедитесь, что полученный материал является желудочным содержимым, с помощью лакмусовой бумажки.
1. Если содержимое желудка не удается получить, введите 5-10 мл стерильной дистиллированной воды или физиологического раствора.
1. Аспирируйте 5-10 мл желудочного содержимого в стерильный контейнер.
Промаркируйте контейнер для мочи на стенке (а не на крышке) перманентным маркером, указав фамилию и инициалы пациента, название отделения

3.4. Моча

Промаркируйте контейнер для мочи на стенке (а не на крышке) перманентным маркером, указав фамилию и инициалы пациента, название отделения и номер пробы (если применимо).
Сверьте маркировку контейнера с информацией, указанной в направлении на исследование.
Выдайте пациенту контейнер для сбора мочи, продемонстрируйте, как открывать и закрывать его.
Объясните пациенту, что перед сбором мочи он должен тщательно подмыться с мылом, нельзя использовать дезинфицирующие средства.
Проинструктируйте пациента, что он должен собрать среднюю часть утренней порции мочи в объеме 50 мл, плотно закрыть контейнер.
Проверьте соответствие числа и маркировки контейнеров с мочой числу и информации заполненных направлений на исследование, плотность закрывания крышек контейнеров.

3.5. Кровь

Кровь берут у пациентов во время подъема температуры. Рекомендуется засевать образцы непосредственно у постели больного.
Вымойте руки, наденьте перчатки.
Промаркируйте флакон, указав фамилию пациента, время взятия пробы и температуру тела пациента.
Снимите отламывающийся колпачок флакона BD BACTEC / BC Autobio и осмотрите флакон на предмет трещин, утечек, загрязнений, избыточной мутности, выпирающей или втянутой мембраны. Не используйте флакон, если обнаружен дефект.
Протрите мембрану тампоном, смоченным 70% спиртом или антисептиком.
Продезинфицируйте место венепункции и дождитесь высыхания антисептика.
Соблюдая правила асептики, заберите шприцом из локтевой вены (центрального катетера) количество крови, указанное на флаконе.
Смените иглу на шприце, проколите крышку флакона и введите кровь во флакон, не допуская попадания воздуха.
Немедленно доставьте флакон в лабораторию. При отсутствии возможности такой возможности, в вечернее время и выходные дни, хранить флакон до доставки в лабораторию при комнатной температуре.

3.6. Другие образцы

Другие образцы (плевральные и иные пунктаты; ликвор; гнойное отделяемое; костный мозг; биопсийный и операционный материал, БАЛЖ, менструальная кровь, кал и др.) собираются в стерильные контейнеры квалифицированным медицинским персоналом с использованием специальных методов.

Порядок приема и распаковки диагностического материала

Лаборатория принимает материал для исследования в рабочие дни с 8.00 до 17.00. При невозможности выполнить исследование в тот же день образцы, доставленные в лабораторию после 11.00, помещаются в холодильник при температуре 2-8^оС до следующего рабочего дня.

1. По прибытии в лабораторию передайте контейнер для транспортировки и пакет с направлениями на исследование сотруднику лаборатории. Не распаковывайте содержимое, так как образцы могут требовать специальных мер предосторожности.

2. Сотрудник, доставляющий образцы, или курьер должен подождать, пока сотрудник лаборатории не закончит процесс приема образца.

3. Сотрудник лаборатории разгружает контейнер с образцами, проверяет соответствие доставленных образцов критериям приемлемости для исследования (Приложение 4), проводит выбраковку образцов, уведомляет сотрудников отделений (учреждений здравоохранения), направивших неприемлемые образцы на исследование. Любое несоответствие образца критериям приемлемости для исследования документируется, так как может повлиять на качество результата.

4. Сотрудник лаборатории обрабатывает контейнер дезинфицирующим средством и передает его курьеру.

5. Для предотвращения отбраковки образцов в случае необходимости уточнения сведений о пациенте сотрудник или курьер, доставляющий образцы, связывается с сотрудниками отделения РНПЦ ПФ или другой организации здравоохранения для получения необходимой информации.

Порядок отбраковки материала

Диагностические образцы, доставленные в лабораторию для исследования, должны соответствовать следующим четырем основным критериям: удовлетворительное качество, правильная маркировка, безопасность для здоровья лабораторного персонала, правильность документации. Лаборатория не принимает на исследование образцы, не соответствующие критериям приемлемости.

Критерий приемлемости образца	Приемлемый образец	Образец, подлежащий выбраковке
1. Качество образца	1.1. Образец собран в стерильный контейнер (пробирка центрифужная 50 мл типа «фалькон» из полипропилена высокой плотности, с завинчивающейся крышкой, коническая градуированная cтерильная; контейнер одноразовый пластиковый, с завинчивающейся крышкой, стерильный или аппликатор ватный на палочке в пластиковой пробирке стерильный (для мазков)) 1.2. Достаточный объем образца: мокрота – 3-10 мл, слизистая или слизисто-гнойная индуцированная мокрота, БАЛЖ – не менее 3 мл моча – не менее 50 мл плевральная жидкость — не менее 3 мл, промывные воды желудка — не менее 3 мл 1.3. Хранение образца до доставки в лабораторию не более 72 часов при температуре 2-8 С	1.1. Образец собран в неправильный контейнер, (стеклянная баночка с резиновой пробкой, приспособленный контейнер, шприц и др.) 1.2. Недостаточный объем образца: мокрота — менее 3 мл или слюна индуцированная мокрота, БАЛЖ – менее 3 мл моча – менее 50 мл плевральная жидкость — менее 3 мл, промывные воды желудка — менее 3 мл 1.3. Не соблюдены срок или температура хранения
2. Маркировка образца	2.1. Контейнер с образцом промаркирован с указанием фамилии пациента, отделения и номера 2.2. Маркировка (фамилия и номер) на контейнере соответствует фамилии и номеру, указанным в направлении на исследование	2.1. Контейнер с образцом не промаркирован 2.2. Маркировка (фамилия и номер) на контейнере не соответствует фамилии и номеру, указанным в направлении на исследование
3. Безопасность образца для здоровья лабораторного персонала	3.1. Образец доставлен в лабораторию в неповрежденном контейнере без следов пролития и контаминации внешних стенок 3.2. Бланк направления на исследование доставлен отдельно от образца	3.1. Образец доставлен в лабораторию в поврежденном контейнере, со следами пролития или контаминации внешних стенок 3.2. Бланк направления на исследование обернут вокруг контейнера
4. Документация	4.1. На каждый запрашиваемый вид исследования (микроскопия нативной мокроты, посев, исследование ВАСТЕС MGIT 960, GeneXpert) для каждого образца представлен специальный бланк направления на исследование 4.2. На бланке направления на исследование указана следующая информация: — фамилия, имя, отчество пациента (полностью, без сокращений) — персональный номер пациента — пол — дата рождения (день, месяц, год) — адрес пациента (населенный пункт, улица, дом, квартира) — учреждение и отделение, направляющее образец для исследования — тип образца — дата сбора образца — цель исследования (диагностика или мониторинг лечения) — сведения о полученном лечении (менее 1 месяца или более 1 месяца) — фамилия лечащего врача 4.3. Тип диагностического образца соответствует запрашиваемому исследованию 4.4. Информация в направлении на исследование написана разборчиво, фамилия, имя, отчество написаны печатными буквами	4.1. Бланк направления на исследование не представлен 4.2. Информация на бланке направления на исследование неполная 4.3. Тип диагностического образца не соответствует запрашиваемому исследованию 4.4. Информация в направлении на исследование написана неразборчиво

Порядок выдачи результатов исследований специалистами (ЛС).

ЛС вносит результаты исследований в бланки направлений на исследование, лабораторные базы данных, регистр «Туберкулез», после чего выдает их в отделения центра и другие организации здравоохранения на бумажном носителе.

Результаты исследования выдаются в отделения центра / ОЗ, направившие диагностический материал от пациента на исследование. Если пациент, сдавший образец для исследования, к моменту выдачи результата переведен для лечения в другое отделение/ОЗ, то по запросу врача, проводящего лечение данного пациента, может быть выдан дубликат результата исследования в отделение/ОЗ, где находится пациент.

Сообщение результатов исследования по телефону возможно только медицинским работникам по обоснованной необходимости. Выдача результатов исследований и сообщение их по телефону пациентам, их родственникам и другим частным лицам запрещена.

Все результаты, сообщаемые в устной форме, должны быть зарегистрированы. Результат исследования, сообщенный по телефону, должен сопровождаться письменным отчетом.

Прием и доставку в отделения выданных результатов исследований могут проводить только медицинские работники отделений центра и курьеры ОЗ, направивших образцы для исследования.

Процедура.

Сроки выдачи результатов исследований

Сроки выполнения исследований значительно варьируют в зависимости от вида исследования. Не менее 95% результатов должны выдаваться в течение установленного срока выдачи результатов исследования.

Вид исследования	Срок выдачи результатов исследования (от даты регистрации образца в лаборатории)
Микроскопическое исследование на КУБ мазка нативной мокроты или осадка	24 часа*
Xpert MTB/Rif	24 часа*
LPA (GenoType MTBDRplus/sl)	до 5 рабочих дней
Посев ВАСТЕС MGIT 960	до 42 дней
Посев на плотные питательные среды	до 9 недель
ТЛЧ на ВАСТЕС MGIT 960	до 15 дней (PZA до 21 дня)
ТЛЧ на среде Левенштейна-Йенсена	до 30 дней

2. Выдача результатов

Результаты регистрируются в лабораторных базах данных и регистре «Туберкулез». Результаты выдаются на бланке направления на исследование или распечататке результата исследования из регистра «Туберкулез» с подписью, личным штампом и датой выдачи результата.

2.1. Выдача отрицательных результатов исследования

Бланки направлений на исследование раскладываются в папки соответствующих отделений центра/ОЗ в почтовых ящиках, расположенных в комнате доставки образцов.

2.2. Выдача положительных результатов исследования

Регистрируется на странице соответствующего отделения журнала выдачи положительных результатов исследования с датой выдачи результатов и всех лабораторных номеров положительных образцов по видам исследований.

Медицинский работник, получающий результаты исследований, сверяет список получаемых результатов по каждому виду исследований с полученными бланками, расписывается в журнале выдачи результатов исследований.

Бланки направлений на исследование из других ОЗ с результатами исследований в папки соответствующих ОЗ в почтовых ящиках, расположенных в комнате доставки образцов.

2.3. Выдача исправленных результатов

При обнаружении ошибки или опечатки в бланке направления и/или в лабораторной базе данных вносятся исправления.

2.3.1. Исправления в письменном отчете до выдачи результата в отделение/ОЗ

2.3.2. Исправления после выдачи результата в отделение/ОЗ

2.3.3. Исправления в электронных лабораторных базах данных

2.3.4. Исправления в электронном регистре «Туберкулез»

2.4. Сообщение результатов по телефону

2.5. Выдача критических результатов исследования

Критический результат – это результат лабораторного исследования, который может свидетельствовать о необходимости изменения тактики ведения и лечения пациента. Критические результаты должны оперативно сообщаться клиническому персоналу (прежде всего врачу, ответственному за ведение пациента, или медицинской сестре), с тем, чтобы были незамедлительно приняты меры для лечения пациента и предотвращения инфицирования пациентов и медперсонала.

К критическим результатам в РРЛ относятся следующие результаты:

положительный результат микроскопического исследования на КУБ у диагностических пациентов;
положительный результат Xpert MTB/RIF у диагностических пациентов;
положительный результат посева на ВАСТЕС MGIT 960 или на плотных питательных средах у диагностических пациентов (при отсутствии положительных результатов микроскопического исследования / GeneXpert);
впервые установленные МЛУ/ШЛУ при выполнении исследований Xpert MTB/RIF, Ultra / Xpert XDR, GenoType MTBDRplus/sl, ТЛЧ на ВАСТЕС MGIT 960 или на среде Левенштейна-Йенсена.

ЛС должен позвонить или отправить факс в ОЗ, откуда был направлен образец для исследования, и сообщить результат. После сообщения по телефону/факсу результат исследования должен быть выдан в виде письменного отчета согласно стандартной процедуре.

С учетом ежедневной доставки положительных результатов исследования в отделения центра, нет необходимости в сообщении по телефону критических результатов, полученных для пациентов центра. Тем не менее, если критический результат получен в пятницу или предпраздничный день в конце рабочего дня (после выполнения доставки результатов в отделения), о таком результате следует сообщить в отделение центра по телефону.

2.6. Извещение о задержке выдачи результата

В процессе выполнения лабораторных исследований возможны временные задержки в выдаче результатов. Причинами могут быть разные факторы на любом этапе диагностического процесса. Это могут быть проблемы, связанные с отсутствием в лаборатории необходимых реагентов и расходных материалов, аварийными ситуациями, поломкой оборудования, контаминацией и др.

Аккредитация и сертификаты

В лаборатории функционирует система управления качеством. Лаборатория принимает участие в международной системе по внешней оценке качества, проводимой сетью Супранациональных лабораторий ВОЗ. Высокое качество нашей работы подтверждено многочисленными сертификатами.